Сальмонеллы. Микробиологическая диагностика сальмонелёза

Оптимальная температура роста 30°. Оптимальная реакция среды для роста -слабощелочная (7,2—7,4). Почти все сальмонеллы хорошо растут на обычных питательных средах, мало отличаясь по характеру роста на пластинчатом агаре гладкие формы сальмонелл образуют круглые очерченные полупрозрачные, выпуклые и влажные колонии с легким металлическим блеском; на скошенном а дают пышный рост, образуя в конденсационной воде сильное помутнение; при рост. на бульоне вызывают равномерное его помутнение.

Сальмонеллы характеризуются следующими ферментативными свойствами не разлагают адонит и не ферментируют сахарозу, подавляющее большинство н » расщепляет салицина и не разлагает лактозу; не образуют индол; не расщепляют мочевину; дают отрицательную реакцию Фогес — Проскауера ; ферментируют глюкозу с образованием газа, хотя встречаются безгаювые варианты отдельных видов сальмонелл, например, S. t phi , S. pullorurn , ферментируют (за небольших t исключением) мальтозу, сорбит и маннит (S. typhi suis обычно не ферментируют маннит ); дают положительную реакцию с метил-рот утилизируют аммиак и редуцируют нитраты; большинство продуцируют сероводород. К арабинозе, дульциту , глицерину, инозиту, рамнозе , ксилозе, трсгалозе , d -, I-, иi-тартрату , нитрату, мукату , малоидту , сальмонеллы относятся по-разному, что позволяет разделять ИХ на различные биохимические типы. Хотя ферментативные свойства сальмонелл далеко не псегда стабильны, кулитуральио-биохимический метод типнрования в идентификации сальмонелл является необходимым и может быть даже решающим в отношении серологических типов, имеющих одинаковую антипенную структуру, например: S. paratyphi В, S. Java , S. cholera suis , S. typhi suis gallinarum , S. put-lorum . Этот метод остается в силе и в связи с тем, что на современном этапе типирование сальмонелл осуществляется путем анализа культуральных, серологических и эпидемиологических I данных.

Серологический метод идентификации основан на наличии в антигенной структуре бактериальной клетки двух основных антигенных комплексов: термостабилыного О-антигена (соматического) и термолабильного Н-антигена (жгутикового). Изучени антипенной структуры выделяемых у людей и животных сальмонелл сопровождаясь открытием новых Ои Н-антигенов, а следовательно и новых типов, значительно расширило общеизвестную серологическую схему Кауфмана—Уайта, в которой к 1971 г . было систематизировано свыше 1600 серологическнх типов сальмонелл.

Сальмонеллы облачают сравнительно высокой устойчивостью к воздействию различных факторов внешней среды. Они погибают в бульоне и в физиологическом растворе после прогревания при 60° в течение часа, при 65°— в течение 30 минут, при 70° — в течение 25 минут, при 75° — в течение 20 минут, при 80° — в течение 1 минуты.

Сальмонеллы весьма устойчивы к действию низких температур н к высушиванию. В комнатной пыли они сохраняют жизнеспособность до ч0, в угольной золе— до 136, в сухом навое—до 90 дней, в сухом кале различных животных — до 4 лет. В воде водоемов сальмонеллы выживают при 0е до 72 дней, при 15° — до 28, при 47° — до 11 дней. В почве, в зависимости от вида сальмонелл, рельефа местности и метеорологических условий эти бактерии могут выживать весьма длительные сроки, полностью сохраняя патогенные свойства (по данным некоторых авторов до 75 месяцев). Сальмонеллы сохраняют жизнеспособность в мясе при хранении на холоде, а при низких плюсовых температурах (не ниже f5°) могут даже размножаться.

Приварке мне сальмонеллы погибают, когда температура внутри куска достигает 80°. В связи с этим по действующему законодательству мясо животных, зараженных сальмонеллами обезвреживают кусками весом не более 2 кг , толщиной до 8 мм , в открытых котлах в течение 3 часов, а в автоклаве при 0,5 атмосферах в течение 2,5 часов; из зараженного мяса допускается изготовление мясных хлебов, весом не более 2,5 кг в специальных электрических и газовых печах. При этом температура не ниже 120° должна сохраняться в течение 2—2.5 часов с достижением внутри куска температуры 85° Патогенез, клиника, диагностика и лечение сальмонеллезов.

Сальмонеллезы группа заболеваний, сопровождающихся разнообразными клиническими проявлениями, вызываемых многочисленными микробами рода сальмонелл. Современное представление о сальмонеллезных заболеваниях не ограничивается лишь пищевыми токсиконифекция'ми сальмонеллезной этнологии.

Сальмонеллезы протекают в различных клинических вариантах, начиная от бессимптомного бактерионосительства до генерализованной формы с септикопиемическим течением.

Патогенез сальмонеллезов сложен и ряд вопросов еще остается не выясненным.

Попавшие в организм человека сальмонеллы в одних случаях вызывают бурно развивающуюся картину токсиконнфекции , в других -циклически протекающий генерализованный инфекционный процесс или септикопиемичекие формы.

Возникновение и развитие сальмонеллезов связано с проникновением в желудочно-кишечный тракт живого возбудителя.

Токсические вещества, попадающие с пищевым продуктом, а также освобождающиеся а кишечнике в результате гибели бактерий, ускоряют продвижение последних в лимфатическое и кровяное русло, обусловливая быстрое проявление заболевания.

Экспериментальные работы последних лет установили', что сальмонеллезные заболевания представляют собой кишечные инфекции, для которых характерна внутриклеточная локализация и размножение возбудителя. В тонком кишечнике сальмонеллы способны проникать через эпителиальный покров вглубь 1. propria , где захватываются активированными ретикулоцитами и макрофагами, в которых размножаются и частично гибнут, Высвобождающийся из разрушенных возбудителей эндотоксин вызывает местные, а попа чая в кровь, и различной интенсив-ности системные поражения (нервной системы, сосудов, сердцу печени других органов). Сальмонеллы способны проникать за пределы желудочно-кишечного тракта в кровь (бактериемия), а также размножаться в различных органах (лимфатические узлы, печень, селезенка, почки, мозг, легкие н др.) что ведет к развитию генерализованного инфекционного процесса.

Кратковременная бактериемия бывает и при гаетроинтестнналь-иых формах, и в этих случаях на первый план и патогенетических механизмах разьнтня болезни выступает интоксикация.

Эндотоксин сальмонелл действует в первую очередь на нервно-сосудистый аппарат.

Нарушение регуляторных функций нервней системы отражается на органах ш щеварения , кровообращения, терморегуляции. В результате нарушения проницаемости сосудов в просвет кишечника попадает большое количество жидкости а вместе с ней калий, натрий, хлориды, которые затем организм теряет во время рве ты и поноса, что способствует развитию водноэлектролнтных нарушений. При тяжелых и среднетяжелых формах в разгаре заболевания наблюдается дегидратация, уменьшение объема циркулирующей плазмы, снижение уровня калия, натрия, хлоридов в сыворотке крови, повыше не ее вязкости, снижение артериального давления, развитие гипоксии и нарушение метаболизма, угнетение функции почек и коры надпочечников — гипортицизм . Все это способствует еще большему гарастаиию интокскхации , повышению остаточного азота, мочевины, молочной кислоты. При тяжег лом течении гастроинтестинальных форм в ряде случаев развивается эндотоксическнй шок, имеющий гиповотемическнй характер со значительней потерей жидкости и электролитов, проявлением которого является циркуяторный коллапс. При генерализованных формах инфекционный процесс может протекать циклично с формированием иммунологических реакций, или при сниженной резне гентности организма в сочетании с гмперергическими реакциями. В большинстве случаев при сальмонеллезах в последующем имеет место обратное развитие патологических процессов, восстановление гомеостаза, регенерация, развитие иммунитета.

Однако, не всегда процесс, заканчивается освобождением организма от возбудителя и может оставаться длительное носительство сальмонелл.

Клиника.

Инкубационный период колеблется от 6 часов до 2—3-х дней, но чаще равен 12—24 часами.

Клинические проявления болезни при сальмонеллезах, отличаясь выраженным полиморфизмом, не ограничиваются только симптомами нарушения функций желудочно-кишечного тракта. Они обусловлены интоксикацией и рядом процессов, возникающих в различных органах и системах, причем гастроинтестинальные расстройства могут совсем отсутствовать. Один и тот же сиротин сальмонелл может обусловливать различные клинические формы болезни. В соответствии с клинической классификацией, предложенной А. Ф. Билибиным , различаются следующие формы сальмонеллезов: 1) локализованная или гастроннтестинальная ; 2) генерализованная с кишечными явлениями и без них; 3) субклнннческая ; 4) нозопаразитическа . с генерализованным и локализованным процессом.

Гастроинтестинальная форма — наиболее часто выявляемая при сальмонеллезной инфекции (40—95%). В большинстве случаев заболевание начинается остро, с желудочно-кишечных симптомов, и реже с общих токсиконнфекционных проявлений, к которым присоединяются. Эта форма характеризуется ознобом и лихорадкой (81%), головной болью (55%), общей слабостью (56%), тошнотой и рвотой (90% болями в животе (79%), диареей (92%). Желудочно-кишечные расстройства начинаются с появления режущих болей в животе, диффузных или локализующихся в эпигастральной области, и реже в нижних отделах, больше справа. Затем присоединяются тошнота и рвота, которые, однако могут отсутствовать. Наиболее постоянным гастроинтестинальным является диарея.

Частота стула различна, преимущественно от 5 до 10 раз в сутки; испражнения обильные, водянистые не приятными зловонным запахом, с примесью хлопьев зеленоватой слизи, а иногда в виде «мясных помоев». Длительность диспептических явлений и расстройства стула у большинства, больных не более 3-5 дней. Для гастроинтестинальной формы наиболее характерен синдром гастроэнтерита. В 5—10% случаев развивается лишь синдром острого гастрита: тошнота,. живота, боли в эпигастральной области без нарушения стула, в сочетании с лихорадкой, головной болью, слабостью, ломотой н теле. Кроме клинических симптомов поражения желудка и тонкого кишечника обнаруживаются также морфологические и функциональные сдвиги, нарушение секреторной, всасывательной и моторной деятельности Симптомы колита встречаются у больных сальмонеллезом значительно реже и преимущественно у лиц с сопутствующими хроническими заболеваниями органов пищеварения (язвенная болезнь, хронический гастрит, холецистит, постднзентерийный колит и др.). При ректороманоскопии у большинства больных слизистая не вменена, но в части случаев выявляются диффузная гиперемия, отек, единичные геморрагии с быстрой репарацией в последующем. С помощью прижизненных морфологических исследований поражение слизистой толстой кишки часто обнаруживается при всех формах сальмонеллеза, но в большинстве случаев оно протекает на субклиническом уровне находя отражения в клинической картине заболевания.

Наряду с гастроинтестинальными симптомами наиболее частыми являются отклонения в состоянии сердечно-сосудистой и нервной системы. В зависимости от выраженности интоксикации и степени обезвоженности имеют место бледности кожных покровов, тахикардия, гипотония, приглушение сердца, адинамия, судороги, головокружения, головная боль, кратковременная потеря сознаны (обморок). Нарушения сердечно-сосудистой деятельности индивидуально различны, ведущими являются изменения в деятельности сердца. У 5—10% Сольных развивается коллапс. На электрокардиограмме выявляются о диффузном поражении миокарда той или иной степени. У больных сальмонеллой в патологический процесс вовлекаются паренхиматозные органы.

Отмечается поражение печени в результате токсического воздействия: увеличение ее размеров и нарушение функционального состояния ( гиперу , обилиногенурия , изменение белковых проб, повышение уровня билирубина и активности ферментоз , альдолаз , трансаминаз , холинестераз ). Поражение поджелудочной железы наблюдается реже. При тяжелом течении гастооннтестинальных форм нарушается выделительная функция почек, В результате токсического воздействия и в связи с расстройством функции сердечнососудистой системы, особенно при развитии длительного коллапса, может наступить острая почечная недостаточность, сопровождающаяся олигурней , азотемией Альбуминурия, микрогематурия , нилиндрурия наблюдается у больных со средне-тяжелым и тяжелым течением болезни и являются скоронроходящнми . Изменения гемограммы характеризуются при более тяжелом течении повышенным содержанием гемоглобина, лейкоцитозом, анэозннофилией и нейтрофилезоы со сдвигом влево, иногда до 60% па-л.очкоядерных клеток, Реакция оседания эритроцитов, как правило, остается нормальной. В большинстве случаев гастроинтестииальные формы протекаю, в виде легких н среднетяжелых острых гастроэнтеритов.

Иногда имеет место очень тяжелое течение болезни с выраженной интоксикацией с быстрым развитием коллапса, гипотермии, появлением бледности и цианоза когчных покровов, холодного пота, судорог в крупных мышцах конечностей, олигурней или анурией, что обусловливается токеикоинфекционным шоком и может закончиться быстрым летальным исходом. У больных сальмонеллезом (в 5%) особенно при тяжелом течении, возникают осложнения и виде нефрозо-нефрита , миокардита, пневмонии, холецистита, токсического гепатита.

Диагноз.

Распознавание сальмонеллезных заболеваний должно быть основано на комплексе клинико-эпидемиолгичесских и лабораторных данных с учетом многообразия вариантов течения.

Клиника сальмонеллезных , доражений вырисовывается довольно определенно.

Сальмонеллез имеет клиника-функциональные и морфологнчике особенности, что отличает его от других острых кишечных инфекций.

Распространенность заболевания, кратковременность течения, относительно небольшой процент обнаружения сальмонелл в практических лабораториях делает прежде всего необходимым постановку диагноза по клинико-эпидемиологическим данным, что возможно при типичном течении гастроинтеетицальных форм в виде ост; ого гастроэнтерита.

Правильная диагностика генерализованных форм, а также легких, стертых, в виде энтерита или острого гастрита, субклинических или сочетанных форм требует применения дополнительных исследований. С целью лабораторного подтверждения диагноза прежде всего используют бактериологический метод (см. раздел лабораторная диагностика. При гастроинтестинальных формах наибольший процент сальмонелл обнаруживается за счет копрокультур , однако этот процесс даже при эпидемических вспышках не превышает 40—45. В качестве экспресс метода можно использовать в отдельных случаях метод флюоресцирующих антител (МФА), при котором путем микроскопиинативных мазков и испражнений илг смывов с чашек Потри, после предварительного подращивания на элективных средах, уже в первый или второй день исследования можно обнаружить сальмонеллы. И серологических методов прибегают к реакции агглютинации (РПГА). Большее практическое значение имеет РПГА комплексным и групповыми О-эритроцитарнымн сальмонеллезными диагностикумами , изготовляемыми Московским. НИИ эпидемиологии и микробиологии.

Антитела выявляются с 4— б дня болезни достигая максимума на 2—3 неделе.

Минимальный—диагностический титр 1:160, но особенно важно нарастание татра антител при повторном исследовании.

Дифференциальные диагноз. При распознавании сальмонеллеза проводится тщательный клинико-лабораторный анализ для исключения инфекционных и неинфекционных болезней, дающих сходные синдромы таких как холера, тифе паратифозные заболевания, отравления грибами химическими веществами, инфаркт миокарда, острые воспалительные заболевания органов брюшной полости.

Динамическое наблюдение за развитием болезни к результаты лабораторных исследований помогают установить окончательный диагноз.

Гастроинтестинальную форму сальмонеллеза бывает трудно дифференцировать от острой дизентерии, начавшейся по типу «пищевой токсикоинфекции », т. е. с явлениями острого, и острейшего гастроэнтероколита , что особенно часто бывает при дизентерии, вызванной шигеллами Зонне . Симптомами, оближеющими эти два заболевания и дающими повод для ошибок, является наблюдающего иногда при дизентерии бурное, как при сальмонеллезе, Начало заболевания с ротовой и болями в животе без особой локализации или с локализацией, в правой подвздошной области; обильный энгепитический , вначале без патологических примесей стул, выраженные явления интоксикации с падением артериального давления, тахикардией, цианозом, судорогами. В клинической картине заболевании опорными симптомами, свойственными сальмонеллезу, является поражение верхних отделов желудочно-кишечного тракта повторная обильная рвота пищевыми массами, облегчение, наступающее после рвоты или особенно, после промывания желудка, тогда как при дизентерии рвота и промывание желудка. не вызывают удушения самочувствия в состояния больного.